1、傳代保存法：有些微生物當(dāng)遇到冷凍或干燥等處理時(shí)，會(huì)很快死亡，因此在這種情況下，只能求助于傳代培養(yǎng)保存法。傳代培養(yǎng)就是要定期地進(jìn)行菌種轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)后再保存，它是基本的微生物保存法，例如酸奶等常用生產(chǎn)菌種的保存。
傳代保存時(shí)
，培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。
一般地
，大多數(shù)菌種的保藏溫度以5℃為好，像厭氧菌、霍亂弧菌及部分病原真菌等微生物菌種則可以使用37℃進(jìn)行保存，而蕈類等大型食用菌的菌種則可以室溫直接保存。
傳代培養(yǎng)保存法雖然簡(jiǎn)便
，但其缺點(diǎn)也很明顯，如：①菌種管棉塞經(jīng)常容易發(fā)霉；②菌株的遺傳性狀容易發(fā)生變異；③反復(fù)傳代時(shí)，菌株的病原性、形成生理活性物質(zhì)的能力以及形成孢子的能力等均有降低；④需要定期轉(zhuǎn)種，工作量大；⑤雜菌的污染機(jī)會(huì)較多。
2、液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng)
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、載體保存法：即將微生物吸附在適當(dāng)載體上進(jìn)行干燥保存的方法。常用的有方法包括以下幾種，如①土壤保存法：主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌種的保藏。方法是在滅菌的土壤中加入菌液，立即在室溫下進(jìn)行干燥或使菌體繁殖后再干燥，然后冷藏或在室溫下密封保存。保存用的土壤原則上以肥沃的耕土為宜，土壤需風(fēng)干、粉碎、過(guò)篩和滅菌。
使微生物在土壤中繁殖后進(jìn)行干燥保存的方法是：取適量土壤（5克）置于塞有棉塞的試管中，加水或加入充分稀釋的液體培養(yǎng)基（以含水量為土壤大持水量的60%為宜）
，然后高壓滅菌。再將需保存的微生物進(jìn)行大量接種，培養(yǎng)至菌絲能用肉眼確認(rèn)的程度為止，移入干燥器中經(jīng)短時(shí)間干燥或風(fēng)干后密封，冷藏或室溫保存。
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?div id="jfovm50" class="index-wrap">、酃枘z保存法：以6～16目的無(wú)色硅膠代替砂子，干熱滅菌后
④磁珠保存法：將菌液浸入素?zé)胖椋ɑ蚨嗫撞Ａе椋┖笤龠M(jìn)行干燥保存的一種方法
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?div id="jpandex" class="focus-wrap mb20 cf">、藜埰V紙）保存法：將滅菌紙片浸入培養(yǎng)液或菌懸液中
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②糖液保存法：適用于酵母菌
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6、冷凍保存法：適用于抗凍力強(qiáng)的微生物
?div id="m50uktp" class="box-center"> 、拊瓌t上應(yīng)盡快進(jìn)行冷凍處理，但當(dāng)加入保護(hù)劑時(shí)
⑦就動(dòng)物細(xì)胞而言
常用的冷凍保存法包括：
?div id="jpandex" class="focus-wrap mb20 cf">、俚蜏乇浔４娣ǎǎ?0℃、－50℃或－85℃）：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便
②干冰保存法（－70℃左右）：即將菌種管插入干冰內(nèi)
，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③液氮保存法（－196℃）：是適用范圍廣的微生物保存法
。其操作步驟如下，a、裝安瓶管：使用盡量濃厚的菌體懸浮于含有適當(dāng)防凍劑（保存霉菌不用防凍劑）的滅菌溶液中
b、熔封安瓶管：若直接貯存于氣相液氮中（－150℃～－170℃）時(shí)
c、檢查安瓶管是否熔封良好：即在4℃下
d
e
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在進(jìn)行冷凍干燥時(shí)
，需注意以下幾個(gè)問(wèn)題：
a、冷凍干燥前的培養(yǎng)條件：首先檢驗(yàn)菌種純度
。一般地說(shuō)，將待保存的微生物在營(yíng)養(yǎng)豐富且容易增菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)為宜；菌齡以達(dá)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期為好；若為有芽孢或孢子的微生物，則以芽孢和孢子形成以后進(jìn)行保存為好；菌液濃度以高為好，如細(xì)菌應(yīng)達(dá)到109～1010/ml。
b、菌株號(hào)碼等的標(biāo)記：可在安瓶外側(cè)標(biāo)記或在安瓶?jī)?nèi)封入標(biāo)簽
。
c
、安瓶的準(zhǔn)備：將安瓶在2%HCl中浸泡過(guò)夜，自來(lái)水沖洗3次后，蒸餾水刷凈，干燥，塞棉塞，貼標(biāo)簽，干熱滅菌或溫?zé)釡缇螅?0℃恒溫干燥。
d
、添加保護(hù)劑：常用的保護(hù)劑有脫脂乳、12%蔗糖、加7.5%葡萄糖的普通肉湯以及加7.5%葡萄糖的血清等等。
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、Bordelli氏法：取干凈的小試管（8×60mm）塞上棉塞，滅菌。用滅菌的脫脂牛乳洗脫試管斜面上的菌苔，制成濃厚菌懸液。然后用無(wú)菌吸管將菌懸液滴入小試管底部。每管一滴
儀器與材料1、斜面菌種：絲狀真菌
、酵母菌、芽孢桿菌和無(wú)芽孢桿菌各一支。
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、接種用具一套。
3、滅菌物品：1ml
、5ml吸管，長(zhǎng)滴管，安瓶管，9ml無(wú)菌水試管，砂土管，液體石蠟，脫脂牛乳。其中，液體石蠟的處理為1.5kg/cm2壓力滅菌1小時(shí)或1kg/cm2壓力滅菌3次，每次30分鐘。接著檢查是否*無(wú)菌，即接入肉湯中檢查有無(wú)雜菌生長(zhǎng)。后放在60～80℃轟烤以去除水分。脫脂牛乳的處理為2000rpm離心10分鐘脫脂，然后0.5kg/cm2壓力滅菌20分鐘，或間歇滅菌3次，經(jīng)檢查無(wú)菌后備用。
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、P2O5，無(wú)水CaCl2各一瓶
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方法1
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3、冷凍干燥保藏法：
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?div id="jpandex" class="focus-wrap mb20 cf">、酆笕〕霭财抗埽⑵渑c真空泵連接
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